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发布日期:2026/7/10 15:01:00

乙酰丁香酮(AS)可诱发根瘤农杆菌细胞内Ti质粒DNA上Vir区基因的活化和高效表达,现已被广泛应用于农杆菌介导的遗传转化中。AS作为诱导性最好的酚类化合物,其作用机理主要是通过诱导农杆菌区基因的活化与表达,促进T-DNA的加工与转移,从而使农杆菌T-DNA更易进入植物基因组并与其整合。

农杆菌Ti或Ri质粒的Vir区编码产物负责接收外界信号、T-DNA的加工、转移及整合等功能,对菌种的侵染力起决定性的作用。农杆菌在生长培养基中培养繁殖时,所有的Vir区基因均处于非转录活性状态,这些基因接受AS等信号分子后便开始转录活化。

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使用浓度:

50-200μmol/L。其中,单子叶植物(如水稻、玉米)常用 100-200μmol/L;双子叶植物(如拟南芥)常用 50-100μmol/L。

添加阶段: 主要在农杆菌预处理和共培养两个阶段添加。仅在共培养阶段添加时效果相对较弱,而预处理(活化时)与共培养阶段协同添加,可最大化激活 Vir 区的效果。

共培养温度: 22-25℃。温度过高(超过 28℃)会降低 Vir 区基因活性;温度过低(低于 20℃)则会延缓农杆菌生长和 T-DNA 转移。

共培养时间: 2-4 天。具体而言,愈伤组织共培养通常为 2-3 天;原生质体共培养为 12-24 小时;整株侵染后的暗培养为 16-24 小时。

溶剂: 乙酰丁香酮难溶于水,需先用二甲基亚砜(DMSO)配制 100mmol/L 的母液(避光保存于 - 20℃),使用时再用培养基稀释至工作浓度。注意 DMSO 终浓度需小于 0.5%,以避免损伤细胞。

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