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G418 二硫酸盐

CAS：108321-42-2

分子式：C20H40N4O10·2H2SO4

分子量：692.71

产品介绍：

G418 Sulfate (G418硫酸盐)，也称作Geneticin (遗传霉素)，是一种结构类似于庆大霉素B1 (Gentamycin B1)的氨基糖苷类抗生素，来源于Micromonospora rhodorangea，虽然它与庆大霉素有关，但G418硫酸氢盐通常不作为标准抗生素使用。它通常作为遗传霉素选择性抗生素而被人们所熟知。它通过抑制转座子Tn601，Tn5的基因，干扰核糖体功能而阻断蛋白质合成，使细胞获得抗性而能在含有G418的选择性培养基中生长。

抗菌谱：

革兰氏阳性的原核生物革兰氏阴性菌中仅限需氧和兼性需氧杆菌真核生物。

作用方式：

与原核生物305和真核生物80S核糖体亚基结合从而影响翻译的保真度。

耐药机制：

氨基糖苷类修饰酶和细胞通透性的变化或核糖体结构的变化

应用：

1.基因转染筛选：

在基因转染实验中，常用G418来筛选成功转染了耐药基因的细胞。转染后的细胞在含有G418的培养基中培养，未转染成功的细胞会被淘汰。

2.基因敲除实验：

G418也被用于基因敲除实验中，通过筛选携带特定突变或缺失的细胞，研究基因功能。

3.稳定细胞系的建立：为了建立稳定表达外源基因的细胞系，研究人员会使用G418进行长时间筛选，确保仅有成功转染并稳定表达耐药基因的细胞得以存活。

注意事项：

G418硫酸氢盐为水溶性盐，常温保存可达1年之久。水溶液应冷冻保存。

使用说明：

1、G418的配制： 取1g G418溶于1ml 1M的HEPES液中，加蒸馏水至10ml，过滤消毒，4度保存。

2、细胞培养：取待测培养细胞，制备成细胞悬液，按等量接种入多孔培养板中，培养6小时左右开始加药。

3、制备筛选培养基：在100ug/ml～1000ug/ml范围内确定几个梯度，比如先做个100ug/ml、400ug/ml、800ug/ml、1000ug/ml，按梯度浓度用培养基稀释G418制成筛选培养基。

4、加G418筛选： 吸除培养孔中培养基，PBS洗涤一次，每孔中加入不同浓度的筛选培养基。

5、换液：根据培养基的颜色和细胞生长情况，每3~5天更换一次筛选培养基。方法同4。

6、确定最佳筛选浓度：在筛选10-14天内能够杀死所有细胞的最小G418浓度即为最佳筛选浓度。